2.2.2.2 SKALAR法
测定酒精自动检测的原理是样品在950被蒸馏出，蒸馏液与重铬酸钾混合，红色的正七价的铬离子被酒精还原成绿色的正三价的铬离子，在590nm处测定吸光度。其具体过程如下：
（1）试剂的配置
①蒸馏试剂的配置，在1000mL蒸馏水中稀释消泡剂并混合。
② Brij溶液的配置，取Brij35 0.25mL，蒸馏水1000mL，稀释Brij35于蒸馏水中，定容至1L。
③显色剂配置，取重铬酸钾60g、硝酸250mL、蒸馏水750mL。在600mL蒸馏水中溶解重铬酸
钾，加入250mL硝酸并定容至1L。
（2）试验过程
实验前首先检查所有试剂瓶中的试剂和标准液，看是否够用，检查泵盖上是否有足够的泵油。检查氮气瓶、气压表、流量计是否能够正常工作。
合上主机的泵盖，按下酒精试剂通道开关，打开主机开关，并打开取样器开关；打开20℃和40℃水浴锅开关；打开氮气载气阀门，酒精载气流速为80单位；打开酒精加热器开关，语言转化器开关，计算机开关，酒精分光光度计开关；然后冷却样品温度到15℃—18℃之间。
摇动大三角瓶，除去样品中的二氧化碳，先轻摇后快摇，直到把样品中的二氧化碳除干净（如有必要，可用滤纸过滤）；发酵液需用中速滤纸过滤；用平面皿盖住瓶口。
★标准曲线的操作与确立
依据GB－4927－2001啤酒，啤酒实验方法对标准啤酒样进行分析化验测出酒精的含量，视为真值。
将已处理好的标准啤酒分别取20mL、40mL、60mL、80mL、
100mL，用蒸馏水定容至100mL，作为标准参数S0、S1、S2、S3、S4，按t（标记峰 标准啤酒 ）、d（漂移校正 标准啤酒）、iw（冲洗蒸馏水 ）、
S0、S1、S2、S3、S4、d、iw的顺序，将标准放置在自动取样器上，做出标准曲线。在编辑参数中输入标准啤酒的真值，计算机将自动结合工作曲线计算出标准值，相关性系数达到0.999以上，确定标准成立。
★进行样品分析
将已处理好的样品装入本机自带的小试管中，按一定顺序放置在自动取样器上，并设置好样品数量。待基线RU值在100—300之间且稳定不变时，即可开始分析。
按取样盘上的“START”键，在控制栏执行开始命令，即可开始工作。根据样品放置的顺序创建表格，将所分析样品编上统一编号。做样时，可在计算机图形栏中监控各系统的正常与否，随时检查试剂量，不足时及时添加，保证峰形正常。当取样器发出鸣叫时，按下仪器取样盘上的“STOP”键。
最后一个样品的酒精峰形出完后，即可在控制栏中执行“STOP”命令。关上仪器试剂通道，用蒸馏水冲洗。然后关掉氮气气压计的气流阀，关掉氮气总阀；在各个通道试剂排空后，关上主机开关，打开泵盖。
数据处理时，选定计算机执行控制栏中的“LOAD”命令，出现提示命令时，输入已做好的标准文件号，计算机将自动计算出样品的酒精值。在“EDIT”命令中查看数据。
（3）试验中的影响因素及其处理办法
①样品的处理：样品在分析以前必须将二氧化碳除干净。
②试剂：显示剂SKALAR所使用的酒精显色剂容易挥发，须储存在棕色瓶中。配置时间不宜过长，并且在5天内有效。随着放置时间的加长，溶液颜色逐渐变深，酒精峰形变尖，测定结果偏高。
③载气纯度：SKALAR检测酒精时载气用氮气，其纯度必须达到99.99%而且压力要稳定。如果氮气纯度达不到99.99%，测出的酒精峰形变低，测定结果亦偏低。
④通道的清洗：SKALAR检测酒精的通道每周要用1∶10的次氯酸钠清洗；如不清洗，进样通道被脏物所堵，进样量达不到所需样品的量，分析出来的样品酒精峰形会变低，测定结果亦偏低。
⑤其他因素的影响，如样品温度、试剂的温度、室温及进样量、中间停机等都会影响测定结果。
★注意事项：在大部分的分析中，第一个出峰比实际要低得多，故要删除并在CV值计算舍弃。当试剂更新时，倒掉试剂瓶中的残液，再用蒸馏水清洗干净，以防微生物及其他干扰。
★除气过程：除水里的气用喷气设备，须具有流速20L/h的氮气，15分钟除水，该过程可除掉所有的气，亦或用煮沸水10分钟的方法除气，使用前冷却到室温。
★维护：避免试剂有任何浑浊，如有必要，将试剂过滤。用于配制试剂的蒸馏水必须经过除气。所使用氮气的纯度必须高于95%。关闭仪器后，一定要把流量计和化学单元之间的管夹紧。
目前，利用SKALAR化学自动分析仪在啤酒成品的酒精含量检测上都很成功，并能与国标法一致， 而且SKALAR化学自动分析仪在啤酒分析中的应用有许多优点。利用此分析技术可以对发酵液、啤酒成品的双乙酰、苦味质、α－氨基氮、β－葡聚糖进行检测。结果表明，该方法与手工法相比，具有分析速度快、准确度高、重现性好、操作简单、消耗低等特点，更适合于大型啤酒厂的大批量样品的分析检测。
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