实验室啤酒酵母培养是整个酵母培养过程的关键组成部分,直接关系到整个酵母培养工作的成败。在酵母培养过程中,应注意以下几个方面:
1 关于麦芽汁培养基的要求
1.1 麦芽汁培养基的制备
实验室所用的麦芽汁,若无特殊用途,最好直接取用糖化车间不加酒花的过滤槽原麦汁(第一麦汁)。取回后,首先调整麦汁至规定浓度,然后经煮沸,去除麦汁中的可凝固性蛋白质,过滤后分装,经蒸汽灭菌锅加压灭菌后备用。
1.2 对麦芽汁培养基浓度的要求
实验室酵母扩大培养所使用的酵母菌种,一般以麦芽汁固体斜面方式长期保存在0℃—4℃的冰箱内,处于体眠状态。低温虽然对减弱酵母细胞内的各种代谢活动有利,但由于保存时间较长(一般为2至4个月时间),固体培养基的养分被大量消耗,酵母细胞基本处于“饥饿”状态。在这种情况下,低温会对酵母正常的细胞结构产生破坏作用,甚至造成酵母细胞的死亡。
因此,在啤酒酵母菌种正式启用前,必须进行酵母菌种的复壮。使酵母细胞内部的各种酶系得以调整,从而逐渐恢复酵母体内各组织的原有功能,使酵母细胞新陈代谢旺盛,生命力增强。
根据研究资料表明:酵母质量受麦汁浓度的影响。因为细胞活性与麦汁浓度紧密相关,所以高浓度麦汁会对酵母质量产生有害的影响。一般用于酵母繁殖的最佳麦汁浓度在7.5°BX-12.5°BX之间,原因如下:
1.2.1 高浓度酒精对酵母细胞增殖的抑制作用
麦芽汁浓度越高,酒精的生产量也就越多(酒精的产生在整个酵母培养过程中是无法避免的)。当培养液中酒精含量不高时,对酵母细胞的繁殖有微弱的激活作用;但当酒精浓度增加到1.4%-2%时,就会抑制酵母细胞的繁殖。这主要是因为酒精会对酵母细胞核产生抑制作用。随着温度的升高,酒精对酵母细胞的这种抑制作用会明显加强。当酒精浓度达到5%时,酵母细胞的繁殖会完全停止,这对正在进行的酵母培养工作是非常有害的。
1.2.2 高浓度麦汁对酵母细胞正常代谢的干扰作用
笔者在酵母培养实际工作中发现:正常情况下,酵母细胞生殖方式为芽殖,很少有裂殖的情况发生。但酵母在浓度为14°BX的麦芽汁培养过程中,发现有个别酵母细胞通过裂殖的方式来繁殖后代。分析后认为,当麦汁浓度过高时,会使酵母细胞内部的新陈代谢发生紊乱,使正常的生殖受到干扰。原因是:酵母细胞在溶质浓度不高的液体培养基中生长时,溶液中的渗透压与细胞中的渗透压相等,细胞正常生长;而当溶液浓度高时,由于外界溶液的浓度高于细胞内的浓度,细胞会脱水收缩,进而影响酵母的正常代谢,从而导致酵母细胞正常的生长方式受到干扰。
1.3 对麦芽汁培养基氨基氮含量的要求
供实验室酵母培养使用的麦汁,要求氮源一定要丰富,因为酵母的增殖需要有合成细胞的含氮物质存在。麦汁中含有氮基酸、肽类、嘌呤、嘧啶以及其他多种含氮物质,这些含氮物质对酵母的繁殖同化有很重要的作用。酵母繁殖所需的氮源主要是麦汁中的氨基酸和低肽,它们不仅对合成酵母的蛋白质很重要,对形成酵母细胞内的各种酶也很重要。所以,供酵母培养使用的麦汁中的氨基氮含量一定要达到180mg/L-220mg/L。若达不到时,应通过调整麦芽与大米或其他谷物原料的使用比例来解决。
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