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内标法和外标法在啤酒低沸点风味物质检测中的应用

华夏酒报·中国酒业新闻网作者：张永国编辑：张怡时间：2008-6-29 18:45:33 订阅邮箱快讯

    　一、方法原理

    　1 外标法

    　外标法，又称校正曲线法，指在相同分析条件下，用已知的标准品配成不同浓度的标准溶液，测量各种浓度的峰高或峰面积，以绘制响应信号与浓度的关系曲线。在同样条件下，测量样品的峰高或峰面积，在校正曲线上查出其对应的样品浓度；或利用样品和标准峰高、峰面积，根据回归曲线方程计算出对应的样品浓度。

    　2 内标法

    　内标法，指在样品中加入内标物，利用被测物与内标物校正因子的比值不变来进行定量。用已知的标准品和内标物配成不同浓度的标准溶液，求得校正因子比值；用测量样品的峰高、峰面积和校正因子比值计算出样品浓度。

    　二、材料与方法

    　1 仪器装置

    　Varian气相色谱仪配有FID检测器；

    　AutoHs自动顶空采样仪；

    　电子天秤（0.0001），微量自动吸样器、100mL容量瓶、1mL刻度吸管。

    　2 材料和试剂

    　色谱纯试剂分别为：无水乙醇、5%乙醇、乙醛、异戊醇、正丙醇、异丁醇、甲醇、乙酸乙酯、乙酸异戊酯、乙酸异丁酯、己酸乙酯、辛酸乙酯、甲酸乙酯、DMS

    　3 色谱条件

    　毛细管柱：DM-WAX色谱柱（30m×0.53mm×2ｕm）。

    　进样口温度：200℃；检测器温度：230℃；载气：氮气（6mL/min）分流比1：10。

    　色谱柱升温程序：40℃保温3min，10℃/min升温至90℃保温1min，30℃/min升到220℃保温3min。

    　4 内标液的配制

    　4.1 准确称取正丁醇原液20.0g于100mL容量瓶中，用色谱纯无水乙醇定容于100.0mL，此为内标原液。

    　4.2 取1.0mL内标原液+4.0mL色谱纯无水乙醇用重蒸水稀释至100.0mL（2000PPM），此为内标使用液。

    　5 风味成分混合原液的配制（见表1）

    　5.1 称取表1所列次序的各风味物质于100mL容量瓶中，用色谱醇无水乙醇定容摇匀，再吸取1mL混合。

    　标准于100mL容量瓶中定容，之后再稀释100倍即为我们所需标准。

    　6 试验方法

    　6.1 内标法

    　6.1.1 内标方法的建立

    　取5mL混标移入20mL顶空瓶中，加入0.1mL内标液，将瓶塞密封，在顶空进样器中55℃保温
30min。在3色谱条件下顶空进样分析，用内标法校正，建立内标方法（见图1）。

    　6.1.2 样品测定

    　取室温下的啤酒样品5mL移入20mL顶空瓶中，加入0.1mL内标液，同上顶空进样分析，加载6.1.1已经建立的内标方法计算出样品中各风味物质的浓度。

    　6.2 外标法

    　6.2.1 外标方法建立

    　取5mL混标，瓶塞密封，在3色谱条件下顶空进样分析，用外标法校正，建立外标方法，计算出各组分的校正系数，保存方法备用。气相色谱法外标法测定啤酒风味物质标样（见图2）。

　6.2.2 样品测定

　取室温下的啤酒样品5mL移入20mL顶空瓶中，同上顶空进样分析，加载6.2.1已建立的外标方法计算样品中各组分的浓度。

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来源：《华夏酒报》

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