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内标法和外标法在啤酒低沸点风味物质检测中的应用

华夏酒报·中国酒业新闻网作者：张永国编辑：张怡时间：2008-6-29 18:45:33 订阅邮箱快讯

    　三、结果与讨论

    　1 精密度和重复性试验

    　1.1 内标法精密度和重复性实验

    　取同一浓度混标按内标法进行三次重复检测（见表2）。

    　从表2可以看出，用内标法测定的结果变异系数均小于3%，说明该方法精密度和重复性都很好，符合气相色谱微量分析的要求。

    　1.2 外标法精密度和重复性试验

    　取同一浓度混标按外标法进行三次重复检测（见表3）。

    　从表3可以看出，用外标法测定结果变异系数相比内标法均偏高，但均小于3%。说明该方法的精密度和重复性较好，符合气相色谱微量分析的要求。

    　2 回收率试验

    　2.1 取5.0mL样品+0.1mL混标+0.1mL内标使用液，用内标法进行测定，计算回收率（见表4）

　从表4可以看出，同一样品回收率测定结果均在90—105%之间。在色谱分析中是可以接受的，可以满足日常分析要求。

　2.2 取5.0mL样品+0.1mL混标，用外标法进行测定，计算回收率（见表5）

　从表5可以看出，同一样品回收率测定结果均在90—105%之间，在色谱分析中是可以接受的，可以满足日常分析要求。

　3 不同公司样品用外标法和内标法的测定结果（见表6）

　从表6可以看出，同一样品用不同的方法检测得出的结果有所偏差，尤其是含量较大的，如乙酸乙酯、正丙醇、异丁醇、异戊醇等偏差较大。所以在选择方法时，应根据实际情况选择适宜的方法。

    　图3和图4是气相色谱法检测百威10.5度啤酒风味物质内标法和外标法色谱图。

    　4 混标放置时间长短对内标法检测结果的影响

    　4.1 混标放置时间长短对内标法检测结果的影响（见表7）

　从表7可以看出，放置时间越长，检测结果差别越大，特别是如乙醛、乙酸乙酯、正丙醇、异丁醇和异戊醇等含量较大的物质，随着放置时间长短的不同，测定结果会随之升高。

　4.2 混标放置时间长短对外标法检测结果的影响（见表8）

    　从表8可以看出，和内标法一样，随着放置时间越长，检测结果差别越大，特别是如乙醛、乙酸乙酯、正丙醇、异丁醇和异戊醇等含量较大的物质，随着放置时间长短的不同，测定结果随之升高，导致测定结果误差较大。

    　5 外界环境温度对内标法检测结果的影响

    　5.1 外界环境温度对内标法检测结果的影响（见表9）

　从表9可以看出，仪器室内温度越高，检测结果越不稳定，同时，乙醛、乙酸乙酯、正丙醇、异丁醇和异戊醇等含量较大的物质随室内温度的升高，测定结果亦随之升高。

　5.2 外界环境温度对外标法检测结果的影响（表10）

    　从表10可以看出，仪器室内温度越高，检测结果越不稳定。同时，乙醛、乙酸乙酯、正丙醇、异丁醇和异戊醇等含量较大的物质随室内温度的升高，测定结果随之升高。

    　四、结论

    　1.用内标法和外标法测定啤酒中风味物质精度都可以达到要求，切实可行。

    　2.外标法操作比较简单，内标法操作比较繁琐。每次都需要添加内标液，但用内标法测定的结果比外标法要低，误差小。尤其对于含量较高的醇和酯，用内标法比外标法结果误差小。所以如果进行科研，则采用内标法较准确；如果用于工业生产，则采用外标法相对方便易行。但无论用何种方法比较数据，都要在相同的方法和相同的条件下比较，否则就没有可比性。

    　3.无论是用内标法还是外标法，样品放置时间的长短都会对结果产生较大的影响。放置时间越长，测定结果的误差越大。主要原因是由于放置过程中环境对其影响较大。另外，因取样时取样瓶中混入氧气，也会对部分物质如乙醛等产生不利影响，主要是因为大部分啤酒企业在啤酒过滤时添加亚硫酸盐等抗氧化剂，其分解的SO2（也包括啤酒发酵时产生的）能与乙醛形成加合物，可以减少游离乙醛的含量。但当SO2被啤酒中溶解氧氧化后，乙醛又会游离出来。这就是啤酒在放置一段时间后，乙醛含量比最初升高的原因，使乙醇发生可逆反应。生成乙醛放置时间的长短，对乙醛、乙酸乙酯、异戊醇测定结果影响较大。

    　4.不管采用哪种方法，环境温度对做样结果影响都比较大。温度越高，测定结果就偏高。因此在夏天做样时，须分批将样品放入，不可一次将一天的样品同时放置于取样器样品盘上，暴露于环境温度下。如果条件允许的话，最好在室内安装空调，将温度稳定在20℃做样。如果确需将样品一次取完，可将样品先放置于0—4℃的冷藏下放置，在做样之前取出，放到进样器设好的位置。这样可使结果更准确可靠。

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来源：《华夏酒报》

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