1 微生物检验技术
1.1 无菌室
1.1.1 无菌室标准
无菌度：10000级；温度：20℃－25℃；湿度：＜60%；压力：0.5Pa，正压，＜1.5Pa。
1.1.2 无菌室管理
（1）微生物操作人员必须具有严格的无菌意识；
（2）操作人员要换上无菌室专用的工作服、鞋、帽、口罩，经风淋门进入；
（3）无菌室内始终保持正压，防止外界空气进入；
（4）外人不得进入无菌室，不用的物品应及时拿出；
（5）定期开紫外灯杀菌，休假日，紫外灯不关；
（6）每周做一次空间卫生检查；
（7）每天工作之前和结束后，清扫无菌室。
1.1.3 培养基
1.1.3.1 培养基类型
（1）麦汁琼脂培养基：检出酵母；
（2）营养琼脂培养基：检出一般细菌；
（3）NBB（NBB－A、NBB－B、NBB－C）培养基：检查啤酒有害菌。
1.1.3.2 培养方法
（1）一般细菌使用营养琼脂培养基，培养温度37℃，有氧培养24小时；
（2）酵母使用麦汁琼脂培养基，培养温度25℃－28℃，有氧培养48小时；
（3）厌氧菌使用NBB培养基，培养温度25℃－28℃，厌氧平板培养5天－7天，或液体培养1星期
－2星期。
1.1.3.3 结果鉴定
（1）镜检：液体培养基中观察混浊沉淀的产生，固体培养基上观察菌落的形成；
（2）产酸情况的观察：若细菌产酸，则培养基的pH值在培养后会发生变化；
（3）闻气味：有些有害菌的代谢产物具有特殊气味，可根据培养后的气味帮助鉴定；
（4）革兰氏染色：用KOH实验法判定菌落的革兰氏阳性和阴性；
（5）过氧化氢酶实验：将纯菌落涂到干燥的载玻片上，滴一滴3%过氧化氢液，好氧菌和兼性好氧菌含有过氧化氢酶，能分解过氧化氢：
过氧化氢酶
2H2O2————→2H2O＋O2
逸出的氧气形成气泡，显示对过氧化氢酶实验阳性；厌氧菌和兼性厌氧菌不能起反应，为过氧化氢酶实验阴性。
1.1.4 对大肠杆菌的检测：大肠杆菌对啤酒厂来说是最严重的污染元素，因此，日常检测非常重要。下面，就是我公司的检测步骤：
1.1.4.1 设备和材料
温箱：36±1℃；水浴：44±0.5℃；天平；显微镜；均质器或乳体；温度计；平皿；试管；吸管；载玻片。
1.1.4.2 培养基及乳体
乳糖胆盐发酵管；伊红美蓝发酵管；乳糖发酵管；蛋白胨水；革兰氏染色液；靛基质试剂。
1.1.4.3 大肠菌群检验程序（表1）
1.1.4.4 操作步骤
（1）检样稀释
①以无菌操作将检样25mL（或25g）放于含有225mL灭菌生理盐水，或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内（瓶内预置适当数量的玻璃珠），或灭菌乳钵内，经充分震荡或研磨，做成1∶10的均匀稀释液。
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