②用1mL灭菌吸管吸取1∶10稀释液1mL，注入含有9mL生理盐水或其他稀释液的试管内，振摇试管混匀，做成1∶100的稀释液。
③另取1mL灭菌吸管，按上项操作依次做10倍递增稀释液，每递增稀释一次，换用1支1mL灭菌吸管。
④根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计，选择3个稀释度，每个稀释度接种3管。
（2）乳糖发酵实验
将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内，接种量在1mL以上者，用双料乳糖胆盐发酵管；1mL及以下者，用单料乳糖发酵管。每一稀释度接种3管，置36±1℃温箱内，培养24±2h，如果所有乳糖胆盐发酵管都不产气，则可报告为大肠菌群阴性，如有产气者，则按下列程序进行。
（3）分离培养
将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上，置36±1℃温箱内，培养18h—24h，然后取出，观察菌落形态，并做革兰氏染色和证实实验。
（4）证实实验
在上述平板上，挑取可疑大肠菌群菌落1个—2个进行革兰氏染色，同时接种乳糖发酵管，置36±1℃温箱内，培养24±2h，观察产气情况。凡乳糖管产气，革兰氏染色为阴性的无芽孢杆菌，即可报告为大肠菌群阴性。
（5）报告
根据证实为大肠菌群阳性的管数，查MPN检索表，报告每100mL（g）大肠菌群的最可能数。
1.2 加强微生物检测操作人员的培训
（1）强化微生物检测人员的无菌意识；
（2）提高微生物检测人员的操作技能；
（3）微生物检测人员一定要注意个人卫生；
（4）个人物品不准随便放于无菌室内；
（5）上班后，立即更换工作服，不穿工作服不准进入无菌室；
（6）取样要准确，确保取样过程的无菌操作；
（7）加强无菌操作，杜绝因操作有误引起的菌检不合格；
（8）严格执行无菌室的杀菌程序，定期开紫外灯杀菌；
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